Pochopení tipů na pipetu s nízkou vazbou

1. Jaké jsou nízko vazebné špičky pipety?

TIPY PIPETTY Nízko vázání jsou laboratorní spotřební materiály určené pro pipetory (pipety), které mají speciální povrchové ošetření a/nebo jsou vyrobeny z konkrétních materiálů. Jejich hlavním návrhovým cílem je významně snižte adsorpci a retenci vzorku na vnitřní stěně špičky .

• Základní problém: Staardní polypropylenové špičky mají povrchy s vlastní hydrofobitou a nábojem, což může vést k nespecifické adsorpci určitých složek vzorku, zejména biomolekul (jako proteiny, nukleové kyseliny) a viskózní roztoky.
• Řešení: Týky s nízkým vázáním mění povrchové vlastnosti vnitřní stěny fyzikálními nebo chemickými metodami, takže je více hydrofilní a inertní, čímž se snižuje interakční síly mezi molekulami a stěnou špičky.

2. jak fungují (technologie úpravy povrchu)

Nízké vazby je primárně dosaženo prostřednictvím následujících technologií:

• Speciální polymerní přísady: Začlenění specifických polymerních přísad (např. Hydrofilní modifikátory) do polypropylenového základního materiálu během produkce, což dává špičkové tělo vlastní nízko-vázané vlastnosti. Toto je současná tradiční a nejstabilnější metoda.
• Povrchové povlaky:
  • Hydrofilní povlaky: Nanesení hydrofilního povlaku (např. Některé polymerní povlaky) na vnitřní stěnu, aby se zvýšila smáčivost povrchu, snížila retenci kapalin a adsorpci proteinu.
  • Inertní povlaky: Použití vysoce inertních povlaků (např. Některé deriváty silanu) ke snížení povrchových aktivních míst a minimalizaci chemické adsorpce.
• Zvláštní ošetření povrchu: Změna mikrostruktury a chemických vlastností povrchu polypropylenu prostřednictvím fyzikálních metod (např. Ošetření plazmy) nebo chemickému leptání pro zvýšení hydrofility.
• Ultra vysoký polypropylen: Použití polypropylenové suroviny s extrémně nízkým obsahem nečistot ke snížení potenciálních adsorpčních míst způsobených nečistotami.

3. klíčové výhody a funkce

• Minimalizuje ztrátu vzorku: To je hlavní výhoda. Významně snižuje adsorpci a retenci vzácných, nízko koncentračních vzorků (např. Proteiny, DNA, RNA, enzymy, protilátky, suspenze buněk, viskózní činidla) na stěně špičky, což zajišťuje pipetting přesnost a zotavení .
• Zlepšuje experimentální přesnost a reprodukovatelnost: Snížená adsorpce znamená konzistentnější výdejní objemy, snižování experimentálních chyb způsobených přenosem vzorku a zvýšení výsledku spolehlivost and reprodukovatelnost .
• Snižuje riziko křížové kontaminace: Úplnější kapalinové vyhoštění a menší zbytky vzorku snižují riziko křížové kontaminace při postupném potrubí různých vzorků.
• Ideální pro citlivé aplikace: Minimalizuje dopad na aktivitu vzorku, díky čemuž jsou zvláště vhodné pro experimenty citlivé na adsorpci v molekulární biologii, buněčné biologii, proteomice, diagnostice atd.
• Zlepšuje smáčivost: Obvykle vykazuje lepší hydrofilitu, což umožňuje tekutině hladce proudit uvnitř špičky, což snižuje adherenci a tvorbu bublin, což vede k plynulejšímu provozu pipety.

4. Klíčové aplikace (které experimenty je zejména potřebují?)

Tipy s nízkou vazbou jsou pro následující aplikace vysoce doporučeny, téměř nezbytné:

• Molekulární biologie:
  • Vysoce výkonná PCR, qPCR, DDPCR: snižuje ztrátu DNA/šablony, zajišťuje účinnost amplifikace a přesnost kvantifikace.
  • Čištění nukleové kyseliny a příprava knihovny: Zabraňuje ztrátě vzácných fragmentů DNA/RNA během čištění.
  • Příprava vzorku NGS: Přesné pipetování drobných knihoven je kritické.
• Proteinový výzkum:
  • Testy koncentrace proteinu (BCA, Bradford atd.): Zabraňuje adsorpci proteinu, což vede k podcenění koncentrace.
  • Testy enzymatické aktivity/kinetika: zajišťuje přesné množství enzymu a zabrání ztrátě aktivity.
  • Příprava vzorku Western blot: Přesné pipetování proteinů v pufrech obsahujících SD nebo redukční činidla.
  • Čištění proteinu (např. Sběr afinitní chromatografické frakce): zabrání ztrátě cílového proteinu.
• Buněčná kultura a související experimenty:
  • Průchody/pokovování drahých buněčných linií nebo primárních buněk: snižuje ztrátu buněčné adheze uvnitř špičky.
  • Testy životaschopnosti buněk: přesné pipetování suspenzí buněk a činidel.
  • Transfekce: Přesné pipetování DNA, RNA, transfekčních činidlových komplexů.
• Diagnostika a klinické testování: ELISA, Chemiluminiscenční imunoanalýzy, POCT: zajišťuje přesné objemy vzorku a činidla, zlepšuje citlivost a přesnost detekce.
• Viskózní nebo pěnová řešení: Glycerol, DMSO, roztoky povrchově aktivní látky, určité pufry: snižuje retenci a přenos a zlepšuje přesnost pipetů.
• Jakýkoli experiment zahrnující vzácné, nepatrné vzorky nebo vyžadující vysokou přesnost a reprodukovatelnost.

5. Jak zvolit pravou nízkonázím špičku pipety?

• Kompatibilita: Hlavním požadavkem je, aby oni mošt Buďte dokonale kompatibilní se značkou a modelem Pipette. Před nákupem vždy ověřte seznamy kompatibility nebo se poraďte s příručkou výrobce.
• Certifikace a kvalita:
  • Certifikovaná RNáza/DNáza/bez pyrogenů: Zásadní pro experimenty molekulární biologie a buněčné kultury. Zajistěte spolehlivou certifikaci.
  • Certifikovaný bez inhibitoru PCR: Velmi důležité pro aplikace PCR/QPCR.
  • Kvalita výroby: Vysoce kvalitní výroba zajišťuje přesné rozměry, konzistentní tvar, nepřítomnost otřepů a nedostatek kontaminace částic (stupeň čistoty). Vyberte renomované značky.
• Úroveň výkonu nízké vazby: Výkon se může lišit mezi značkami a řadami. Věnujte pozornost údajům o výkonu poskytované výrobcem (např. Zprávy o zkouškách pro proteinové adsorpční zbytky). Pro extrémně náročné aplikace (např. Sekvenování s jedním buňkami, detekce proteinu s ultra nízkým množstvím) mohou být nutné špičkové nízké vazebné špičky.
• Balení a sterilita:
  • Formát balení: Rased (naskládaný nebo hromadný), zabalený, filtrovaný (volitelný). Vyberte si obal vhodný pro vaše potřeby pracovního postupu a automatizace.
  • Filtrované tipy: Pokud je nutné zabránit kontaminaci aerosolu pipetové hřídele, zvolte tipy s nízkým vázáním s filtry (špičky filtru s nízkým vázáním). Samotný filtr by měl být také nízký vazba.
  • Předem sterilizováno: Většina experimentů vyžaduje předem sterilizované tipy (obvykle ozářené gama). Ověřte metodu sterilizace a úroveň zajištění sterility (SAL). Nesterilní tipy jsou vhodné pro některé nekritické aplikace nebo pokud laboratoř provádí vlastní sterilizaci.
• Nákladová efektivita: Tipy s nízkou vazbou jsou obecně dražší než standardní tipy. Vyhodnoťte nákladovou efektivitu při splnění požadavků na výkon. Neohrožujte kritické experimenty pomocí standardních tipů k úspoře nákladů, protože nepřesná data nebo ztráta vzorku mohou vést k většímu odpadu.

6. Poznámky k použití

• Správné přílohy: Ujistěte se, že špička je bezpečně a pohodlně připojena k pipetě bez mezer, aby se zabránilo úniku vzduchu a nepřesných objemů.
• Předběžné kvílení: U viskózních nebo těkavých kapalin může předběžné zatížení (aspirace a vydávání kapaliny několikrát před skutečným přenosem) někdy dále zlepšit přesnost (i s nízkými vazebnými špičkami). Sledujte pokyny pro provoz Pipette.
• Vyvarujte se dotyku špiček: Udržovat sterilitu a zabránit kontaminaci.
• Skladování: Uložte na chladném a suchém místě od přímého slunečního světla a prachu. Všimněte si data vypršení platnosti na obalu.